標(biāo)記抗體及抗體偶聯(lián)磁珠

發(fā)光大包裝試劑

層析檢測(cè)大板

解離劑

• 層析檢測(cè)大板
• 發(fā)光大包裝試劑

樣本符合率——時(shí)間分辨熒光免疫層析平臺(tái)

用V2.0版及初代（V1.0版）E2檢測(cè)大板（Q201p1）分別檢測(cè)17例羅氏賦值血清樣本（濃度范圍6.69~2745pg/mL），樣本符合率（R²）分別為0.974和0.9622。

圖1.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-V2.0版）

圖2.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-V1.0版）

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	6.69	0.0072
2	13.35	0.0023
3	18.53	0.0082
?	?	?
16	2189	7.3781
17	2745	10.9716

表1.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-V2.0版）

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	6.69	0.0097
2	13.35	0.0109
3	18.53	0.0193
?	?	?
16	2189	0.4927
17	2745	0.6821

表2.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-V1.0版）

A.羅氏樣本符合率——時(shí)間分辨熒光免疫層析平臺(tái)

A客戶使用歐凱E2檢測(cè)大板（Q201p1-V2.0）檢測(cè)26例羅氏賦值血清樣本（濃度范圍17~874pg/mL），樣本符合率（R²）為0.9497。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	17	0.0035
2	23	0.0033
3	33	0.0028
?	?	?
25	851	1.0785
26	874	1.1424

表3.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-A客戶）

圖3.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-A客戶）

B.羅氏樣本符合率——時(shí)間分辨熒光免疫層析平臺(tái)

B客戶用Q201p1-V2.0檢測(cè)19例羅氏賦值血清樣本（濃度范圍15.99~770.84pg/mL），樣本符合率（R²）為0.9456。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	15.99	0.0054
2	31.34	0.0083
3	44.41	0.0210
?	?	?
18	500.54	0.5941
19	770.84	0.8676

表4.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-B客戶）

圖4.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-B客戶）

C.羅氏樣本符合率——時(shí)間分辨熒光免疫層析平臺(tái)

C客戶用Q201p1-V2.0檢測(cè)24例羅氏賦值血清樣本（濃度范圍7.12~1949.11pg/mL），樣本符合率（R²）為0.9675。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	7.12	0.0005
2	10.74	0.0110
3	20.28	0.0054
?	?	?
23	1669.76	2.5763
24	1949.11	3.8466

表5.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-C客戶）

圖5.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-C客戶）

D.羅氏樣本符合率——時(shí)間分辨熒光免疫層析平臺(tái)

D客戶用Q201p1-V2.0檢測(cè)13例羅氏賦值血清樣本（濃度范圍10.0~2455.93pg/mL），樣本符合率（R²）為0.9692。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	T/C值
1	10.00	0.0007
2	12.16	0.0022
3	15.19	0.0031
?	?	?
12	1779.97	1.4863
13	2455.93	2.6884

表6.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（羅氏賦值-D客戶）

圖6.E2臨床對(duì)比分析
（羅氏賦值-D客戶）

1.校準(zhǔn)曲線——化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（AE）

使用適于吖啶酯體系的E2發(fā)光大包裝試劑（Q200p1）檢測(cè)E2校準(zhǔn)品（濃度范圍0~4486.2pg/mL）。

編號(hào)	濃度（pg/mL）	RLU
1	0	1767
2	9.84	5124
3	100.3	93561
4	489.5	1368038
5	1012.1	3352793
6	4486.2	12100346

表7.E2校準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

圖7.E2校準(zhǔn)曲線

2.全段質(zhì)譜樣本符合率——化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（AE）

用Q200p1-V2.0檢測(cè)84例質(zhì)譜賦值樣本（濃度范圍15.6~4290pg/mL），信號(hào)梯度明顯，樣本符合率（R²）為0.9963。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	檢測(cè)濃度 （pg/mL）
1	15.6	14.3
2	15.7	13.0
3	17.3	18.4
?	?	?
83	4123	4257
84	4290	4470

表8.E2臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（質(zhì)譜賦值）

圖8.E2臨床對(duì)比分析
（質(zhì)譜賦值）

3.低端質(zhì)譜樣本符合率——化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（AE）

用Q200p1-V2.0檢測(cè)40例質(zhì)譜賦值低濃度樣本（濃度范圍15.6~102.6pg/mL），樣本符合率（R²）為0.9063。

編號(hào)	樣本濃度 （pg/mL）	檢測(cè)濃度 （pg/mL）
1	15.6	14.3
2	15.7	13.0
3	17.3	18.4
?	?	?
39	89.2	88.6
40	102.6	105.3

表9.E2低值樣本臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)
（質(zhì)譜賦值）

圖9.E2低值樣本臨床對(duì)比分析
（質(zhì)譜賦值）

4.交叉反應(yīng)性——化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（AE）

Q200p1升級(jí)后，阻斷劑用量降低，與E3幾乎無交叉，檢測(cè)特異性顯著提升。

圖10.Q200p1的交叉反應(yīng)性

雌二醇（Estradiol, E2）是一種常見的內(nèi)源性雌激素，屬于類固醇，水中溶解度小，易溶于油脂類物質(zhì)。E2在女性育齡期和妊娠期前6周主要由卵巢合成，妊娠后期則由胎盤合成。合成后的E2進(jìn)入外周循環(huán)系統(tǒng)，與性激素結(jié)合球蛋白（HSBG）、白蛋白發(fā)生可逆性結(jié)合。外周循環(huán)中98%的雌二醇以蛋白結(jié)合的形式存在，其中約60%與白蛋白結(jié)合，40%與HSBG結(jié)合；剩余的E2則以游離形式存在，擴(kuò)散到靶組織發(fā)揮其生物功能。

在卵巢中產(chǎn)生的E2，由發(fā)育卵泡中內(nèi)泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞協(xié)同分泌，在內(nèi)泡膜細(xì)胞的酶系統(tǒng)作用下，乙酰CO-A或膽固醇先轉(zhuǎn)化成雄激素，雄激素再進(jìn)入顆粒細(xì)胞，經(jīng)芳香化作用形成雌二醇和雌酮（E1）。絕經(jīng)后E2主要由雌酮（E1）外周轉(zhuǎn)化而來。

胎盤中的E2是由妊娠期母體和胎兒合成的硫酸去氫異雄酮水解為去氫異雄酮，再轉(zhuǎn)化為雄烯二酮，經(jīng)芳香化處理形成。

雌二醇（E2）的生物學(xué)功能

人體E2可以促進(jìn)卵細(xì)胞的生成和發(fā)育，促進(jìn)卵巢和女性生殖系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育，維持生殖功能及第二性征；另外對(duì)男性精子發(fā)生，精子成熟有重要作用。E2通過與事先結(jié)合了休克蛋白（Hsp）的雌激素受體（ER）結(jié)合，使ER發(fā)生變構(gòu)，釋放Hsp，激活ER。受體-配體復(fù)合物單體進(jìn)一步向細(xì)胞核內(nèi)擴(kuò)散，與靶DNA雌激素反應(yīng)元件（ERE）上的兩個(gè)半臂結(jié)合，形成同型二聚體或異型二聚體復(fù)合物；刺激靶基因轉(zhuǎn)錄，從而影響細(xì)胞的增殖和分化。另外E2可與組織中特異性分布的ER亞型（ER_α、ER_β）結(jié)合，選擇性作用靶組織。

雌二醇（E2）的臨床應(yīng)用

A. 不孕癥診斷

E2是臨床不孕癥診斷和治療的重要指標(biāo)，可輔助判斷生殖內(nèi)分泌功能是否異常。正常的月經(jīng)周期中，隨著卵巢中卵泡的發(fā)育，E2水平逐漸升高；卵泡發(fā)育成熟時(shí)，E2水平迅速升高至峰值。下丘腦因E2的正反饋，釋放大量促性腺激素釋放素（GnRH），垂體前葉釋放大量促卵泡激素（FSH）和少量黃體生成素（LH），促發(fā)排卵。不孕的女性排卵期激素水平則相反，由于卵巢分泌E2不足，體內(nèi)E2比正常水平低；不能形成排卵前的高潮，難以引起對(duì)下丘腦-垂體的正反饋效應(yīng)，導(dǎo)致不排卵。不孕患者常伴有月經(jīng)失調(diào)、閉經(jīng)等癥狀。

B. 早期先兆流產(chǎn)、葡萄胎等妊娠期疾病監(jiān)測(cè)

E2水平可用于監(jiān)測(cè)在整個(gè)妊娠期的妊娠相關(guān)疾病。妊娠初期E2水平可以反映優(yōu)勢(shì)卵泡的質(zhì)量和卵巢黃體的功能。E2雖然在體內(nèi)的含量比較少，但是整體呈升高趨勢(shì)；若E2超過排卵的閾值，證明胎盤接替了卵巢黃體的功能，維持繼續(xù)妊娠，且胎盤單位功能良好。E2與人絨毛膜促性腺激素（HCG）、孕酮水平聯(lián)合監(jiān)測(cè)，可以預(yù)測(cè)早期先兆流產(chǎn)。E2結(jié)合孕酮、抑制素B水平可預(yù)測(cè)妊娠者患葡萄胎的風(fēng)險(xiǎn)。

C. 更年期綜合征、卵巢早衰診斷

E2是診斷更年期綜合征、卵巢早衰的特異性指標(biāo)。正常月經(jīng)女性體內(nèi)的雌激素主要是E2，95%的E2來自于卵巢的優(yōu)勢(shì)卵泡和黃體。絕經(jīng)前期，黃體分泌不足，E2下降；進(jìn)入絕經(jīng)期后，卵巢功能衰退，E2分泌量顯著減少，垂體因缺乏激素的反饋?zhàn)饔?，F(xiàn)SH、LH分泌增加。因此E2顯著下降，F(xiàn)SH、LH明顯升高，可作為診斷更年期綜合征、卵巢早衰的依據(jù)。

D. 輔助判定人工授精時(shí)機(jī)

人工授精技術(shù)本身臨床妊娠率較低，影響人工授精成功的一個(gè)重要因素就是授精時(shí)機(jī)。E2水平可輔助判斷人工授精的最佳時(shí)機(jī)。E2和LH水平可提示卵子的成熟情況，幫助判斷注射HCG的時(shí)機(jī)。E2過低，卵子不成熟或卵子本身發(fā)育不良；E2過高，雌孕激素比例失調(diào)，胚胎植入能力降低，不利于妊娠。